服務(wù)編號(hào)：BIOFW059
服務(wù)簡(jiǎn)介
經(jīng)典的抗體產(chǎn)生需要雜交瘤細(xì)胞的生成，涉及動(dòng)物免疫和細(xì)胞融合等步驟，制備時(shí)間長(zhǎng)達(dá)數(shù)月。噬菌體表面展示技術(shù)直接略過(guò)了這兩個(gè)步驟，由于抗體來(lái)源可以跨越物種，能直接提供人抗體，與此同時(shí)，也可以快速應(yīng)用多種需要篩選的場(chǎng)景，例如抗體親和力成熟等。
噬菌體展示技術(shù)其基本原理是：將編碼多肽的外源DNA片段與噬菌體表面蛋白的編碼基因融合后，以融合蛋白的形式呈現(xiàn)在噬菌體的表面，被展示的多肽或蛋白可保持相對(duì)的空間結(jié)構(gòu)和生物活性，展示在噬菌體的表面。導(dǎo)入了各種各樣外源基因的一群噬菌體，就構(gòu)成一個(gè)展示各種各樣外源肽的噬菌體展示庫(kù)。當(dāng)用一個(gè)蛋白質(zhì)去篩查一個(gè)噬菌體展示庫(kù)時(shí)，就會(huì)選擇性地同與其有相互作用的某個(gè)外源肽相結(jié)合，從而分離出展示庫(kù)里的某個(gè)特定的噬菌體，研究該噬菌體所含外源基因的生物學(xué)功能。
噬菌體展示技術(shù)為全人源治療性抗體的研發(fā)提供了基礎(chǔ)，拓展了定向進(jìn)化技術(shù)在抗體多肽改造篩選方面的應(yīng)用，對(duì)抗體藥物的研制具有重要意義。用抗體、受體、核酸、以及某些碳水化合物可以從噬菌體隨機(jī)肽庫(kù)中篩選出與之結(jié)合的肽段，因此在抗原表位分析、分子間相互識(shí)別、新型疫苗及藥物的開(kāi)發(fā)研究方面有廣泛的應(yīng)用前景。
M13單鏈絲狀噬菌體展示系統(tǒng)是目前應(yīng)用廣泛的文庫(kù)展示系統(tǒng)，通過(guò)將蛋白、抗體或多肽與噬菌體pIII蛋白融合表達(dá)，使之參與噬菌體組裝，并展示在噬菌體表面，形成噬菌體展示文庫(kù)。使用噬菌體展示文庫(kù)，針對(duì)特定靶分子進(jìn)行3-5輪親和篩選，可以富集能特異性結(jié)合靶分子的噬菌體，然后進(jìn)行富集、擴(kuò)增及基因序列測(cè)定，推斷外源蛋白的氨基酸組成。
百歐泰目前開(kāi)發(fā)的噬菌體展示技術(shù)服務(wù)平臺(tái)涵蓋了免疫抗體庫(kù)、天然抗體庫(kù)等常用的文庫(kù)類(lèi)型，可根據(jù)客戶(hù)的特殊需求定制個(gè)性化文庫(kù)，并提供靈活高效的篩選服務(wù)。
服務(wù)步驟
1 抗體基因庫(kù)的獲得
收集目標(biāo)抗體宿主的免疫細(xì)胞，提取細(xì)胞總RNA
反轉(zhuǎn)錄后，使用多對(duì)引物分別擴(kuò)增VH-CH1抗體基因片段和VL-CL1抗體基因片段
2 抗體基因庫(kù)轉(zhuǎn)化大腸桿菌
將擴(kuò)增的抗體基因庫(kù)連接至pComb3質(zhì)粒，隨后電轉(zhuǎn)化大腸桿菌
鑒定抗體基因插入率
3 構(gòu)建噬菌體載體
對(duì)大腸桿菌進(jìn)行噬菌粒拯救
集上清獲得噬菌體Fab抗體庫(kù)
4 抗體庫(kù)的滴度測(cè)定
噬斑培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)
5 噬菌體抗體庫(kù)的富集篩選
使用靶標(biāo)抗原包被酶聯(lián)板，加入噬菌體抗體進(jìn)行孵育
服務(wù)優(yōu)勢(shì)
噬菌體展示抗體技術(shù)優(yōu)勢(shì)：
l 省去細(xì)胞融合步驟，避免因雜交瘤不穩(wěn)定而反復(fù)亞克隆的繁瑣程序，極大的提高庫(kù)容量；
l 可篩選出與抗體特異性結(jié)果的噬菌體，獲得該抗體識(shí)別的抗原表位，進(jìn)行抗原表位分析；
l 可獲得高親和力的人源化抗體。
百歐泰團(tuán)隊(duì)具有豐富的大腸桿菌系統(tǒng)蛋白表達(dá)經(jīng)驗(yàn)，可提供多種服務(wù)優(yōu)勢(shì)：
l 豐富的經(jīng)驗(yàn)積累，成熟的技術(shù)路線(xiàn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定可靠；
l 一站式服務(wù)，擁有完善的抗體，蛋白平臺(tái)，用以支持噬菌體抗體的免疫及篩選工作；
l 服務(wù)為主：可根據(jù)客戶(hù)需求綜合分析，設(shè)計(jì)不同的實(shí)驗(yàn)方案，選擇快速、合適的建庫(kù)技術(shù)與篩選體系；
l 專(zhuān)業(yè)的技術(shù)支持，隨時(shí)為您解答出現(xiàn)的任何問(wèn)題。
服務(wù)流程
雙方溝通一致后確定實(shí)驗(yàn)方案，確定服務(wù)要求-簽訂合同—預(yù)付款-開(kāi)始實(shí)驗(yàn)-成果交付
相關(guān)產(chǎn)品推薦
相關(guān)服務(wù)推薦
酵母蛋白表達(dá)系統(tǒng) 乳酸菌蛋白表達(dá)系統(tǒng) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)蛋白表達(dá)系統(tǒng) 哺乳動(dòng)物細(xì)胞蛋白表達(dá)系統(tǒng) 枯草芽孢桿菌蛋白表達(dá)系統(tǒng) 小分子抗原的制備及偶聯(lián)服務(wù) 大規(guī)模蛋白發(fā)酵服務(wù) 蛋白純化服務(wù)
You can place an order or Inquiry through the following methods, and we will contact you ASAP:
QQ 499854788; 82458988
Email info@biotyscience.com
Tel 400-669-8850
QQ交談
